Các sản phẩm

Monogalactopyranosides của fluorescein và fluorescein methyl ester: tổng hợp, thủy phân bằng enzym bằng β-galactosidase biotyl hóa và xác định hệ số khuếch tán tịnh tiến

Fluorescein monoglycoside (d-galactopyranoside (FMG) và d-glucopyranoside) và metyl este của chúng (MFMG) đã được điều chế từ acetobromoglucose/galactose và este metyl fluorescein với hiệu suất tốt.Các thí nghiệm thủy phân bằng enzym (sử dụng β-galactosidase đánh dấu biotin) của các dẫn xuất galacto đã được thực hiện và các thông số động học đã được tính toán.Cường độ huỳnh quang tăng 15-20 lần đã được quan sát thấy trong quá trình thủy phân.Sự gia tăng tuyến tính của huỳnh quang đã được ghi nhận trong thời gian ngắn và nồng độ cơ chất thấp, làm cho các hợp chất này trở nên hữu ích và nhạy cảm với các đầu dò galactosidase.Độ lớn của giá trị hằng số Michaelis–Menten (Km) đối với MFMG cao hơn so với FMG cho thấy có thể có sự thay đổi về hình dạng của chất nền fluorogen.Giá trị km đối với β-Gal được đánh dấu biotin bằng FMG thấp hơn so với giá trị của enzyme tự nhiên.Quan sát này cho thấy ái lực cơ chất cao hơn của enzyme đánh dấu biotin so với enzyme tự nhiên.Các hệ số khuếch tán tịnh tiến đã được đo, cho cả chất nền phát huỳnh quang và cả sản phẩm, sử dụng quang phổ tương quan huỳnh quang.Hệ số khuếch tán tịnh tiến đối với chất nền fluorogen và sản phẩm thủy phân enzym đã được đo là tương tự nhau, trong khoảng 3,5–4,5 × 10−10 m2 s−1.Do đó, sự tăng cường hoặc làm chậm động học enzyme do sự khác biệt về tính di động tịnh tiến của cơ chất và sản phẩm là không rõ ràng.