Các sản phẩm

LecA (PA-IL) là một lectin và chất kết dính gây độc tế bào được sản xuất bởi Pseudomonas aeruginosa, liên kết với các galactoside kỵ nước với tính đặc hiệu và ái lực cao.Bằng cách sử dụng phản ứng tổng hợp dịch mã lecA-egfp và phân tích immunoblot của ma trận ngoại bào màng sinh học, chúng tôi cho thấy rằng lecA được thể hiện trong các tế bào phát triển màng sinh học.Trong các thử nghiệm màng sinh học tĩnh trên cả polystyrene và thép không gỉ, độ sâu của màng sinh học và độ che phủ bề mặt đã giảm do đột biến của lecA và được tăng cường trong chủng PAO-P47 sản xuất quá mức LecA.Độ bao phủ bề mặt màng sinh học của chủng gốc, PAO-P47 nhưng không phải chủng đột biến lecA trên phiếu thép cũng bị ức chế bởi sự tăng trưởng khi có mặt của isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) hoặc p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Hơn nữa, các màng sinh học kiểu hoang dã trưởng thành được hình thành trong trường hợp không có các galactoside kỵ nước này có thể được phân tán bằng cách bổ sung IPTG.Ngược lại, việc bổ sung p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) có ái lực cao với lecti n P. aeruginosa LecB (PA-IIL) không có tác dụng đối với sự hình thành hoặc phân tán màng sinh học.Sự tăng trưởng sinh vật phù du của P. aeruginosa PAO1 không bị ảnh hưởng bởi sự hiện diện của IPTG, NPG hoặc NPF, chủng này cũng không thể sử dụng các loại đường này làm nguồn carbon, cho thấy rằng các tác động quan sát được đối với sự hình thành màng sinh học là do sự ức chế cạnh tranh của phối tử LecA ràng buộc.Các kết quả tương tự cũng thu được đối với màng sinh học được phát triển trong điều kiện dòng chảy động trên các phiếu thép, cho thấy rằng LecA góp phần vào kiến ​​trúc màng sinh học P. aeruginosa trong các điều kiện môi trường khác nhau.

Một alpha-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) có thể giải phóng dư lượng t-fucosyl từ chuỗi bên của oligosacarit xyloglucan đã được phát hiện trong lá của cây Arabidopsis.Ngoài ra, một alpha-L-fucosidase có tính đặc hiệu cơ chất tương tự đã được tinh chế từ lá bắp cải (Brassica oleracea) để tạo ra một dải đơn trên TRANG SDS.Hai trình tự peptit thu được từ dải protein này và chúng được sử dụng để xác định gen Arabidopsis mã hóa cho alpha-fucosidase mà chúng tôi đề xuất gọi là AtFXG1.Ngoài ra, một gen Arabidopsis tương đồng với alpha-L-fucosidase đã biết cũng đã được tìm thấy và chúng tôi đề xuất đặt tên cho nó là AtFUC1.Cả AtFXG1 và ATFUC1 đều được biểu hiện khác loại trong các tế bào Pichia pastoris và các hoạt tính alpha-L-fucosidase được tiết vào môi trường nuôi cấy.Alpha-L-fucosidase được mã hóa bởi AtFXG1 hoạt động chống lại các oligosacarit từ xyloglucan XXFG cũng như chống lại 2'-fucosyl-lactitol nhưng không hoạt động chống lại p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Tuy nhiên, AtFUC1 được biểu hiện khác loại chỉ hoạt động với 2'-fucosyl-lactitol.Do đó, cái trước phải liên quan đến chuyển hóa xyloglucan.