Các sản phẩm

Sự tích lũy hạt nhân của một dạng đột biến của protein nhân Lamin-A, được gọi là Progerin (PG) hoặc Lamin AΔ50, xảy ra trong Hội chứng lão hóa Hutchinson-Gilford (HGPS) hoặc Progeria, một bệnh lão hóa nhanh.Một trong những triệu chứng chính của chứng rối loạn di truyền này là mất lớp mỡ dưới da do chứng loạn dưỡng mỡ nghiêm trọng. Chúng tôi đã ổn định tạo ra biểu hiện của PG và GFP ở người - Protein huỳnh quang xanh - dưới dạng kiểm soát trong các tế bào 3T3L1 bằng cách sử dụng hệ thống lentivirus để nghiên cứu ảnh hưởng của biểu hiện PG đến khả năng biệt hóa của dòng tế bào này, một trong những mô hình tạo mỡ được sử dụng nhiều nhất.Định lượng proteomics (iTRAQ) đã được thực hiện để nghiên cứu ảnh hưởng của việc tích lũy PG.Một số protein điều chế đã được xác nhận bằng phương pháp immunoblinating và PCR thời gian thực.Chức năng ty thể được phân tích bằng cách đo lường a) hoạt động cơ bản của ty thể, b) sản xuất anion superoxide và c) hiệu quả riêng lẻ của phức hợp khác nhau của chuỗi hô hấp. Chúng tôi nhận thấy rằng PG biểu hiện quá mức bằng cách cung cấp gen lentivi ral dẫn đến một giảm tỷ lệ tăng sinh và khiếm khuyết về khả năng tạo mỡ khi so sánh với đối chứng.Phân tích định lượng protein cho thấy 181 protein được điều biến đáng kể (p<0,05) trong preadipocytes biểu hiện PG.Chức năng ty thể bị suy giảm trong các tế bào biểu hiện PG.Cụ thể, chúng tôi đã phát hiện ra sự gia tăng hoạt động của phức hợp I và sự sản xuất dư thừa anion Superoxide.Việc ủ với các chất nhặt rác của các loài oxy phản ứng (ROS) làm giảm quá trình phân giải protein tự thực như được tiết lộ bởi tỷ lệ LC3-II/LC3-I. Biểu hiện PG trong các tế bào 3T3L1 thúc đẩy những thay đổi trong một số Quá trình sinh học, bao gồm cấu trúc của khung tế bào, chuyển hóa lipid, canxi quy định, dịch mã, gấp nếp protein và tạo năng lượng bởi ty thể.Dữ liệu của chúng tôi củng cố sự đóng góp của sự tích lũy ROS vào kiểu hình lão hóa sớm và thiết lập mối liên hệ giữa rối loạn chức năng ty thể và mất cân bằng protein trong HGPS.