Các sản phẩm

Mycobacterium tuberculosis có thể tồn tại hàng chục năm trong cơ thể người.Các con đường phản ứng nghiêm ngặt liên quan đến polyphosphate vô cơ [poly(P)], được tổng hợp và thủy phân bởi polyphosphate kinase (PPK) và exopolyphosphatase (PPX), tương ứng, được cho là đóng vai trò điều hòa chính trong sự tồn tại của vi khuẩn.Ở đây, chúng tôi chỉ ra rằng sự tích lũy poly(P) của M. tuberculosis có liên quan tạm thời đến việc hạn chế sự phát triển của trực khuẩn.Chúng tôi cũng xác định M. tuberculosis Rv1026 là một exopolyphosphatase mới có hoạt tính thủy phân chống lại poly (P) chuỗi dài.Sử dụng hệ thống biểu hiện cảm ứng tetracycline để loại bỏ biểu hiện của Rv1026 (ppx2), chúng tôi thấy rằng sự tích lũy poly(P) của M. tuberculosis dẫn đến tăng trưởng chậm lại và giảm tính nhạy cảm với isoniazid, tăng khả năng chống lại nhiệt và pH axit, đồng thời tăng cường khả năng sống sót trong tế bào trong quá trình lây nhiễm đại thực bào.Bằng kính hiển vi điện tử truyền qua, chủng phân hủy ppx2 biểu hiện độ dày thành tế bào tăng lên, điều này có liên quan đến việc giảm tính thấm của thành tế bào đối với các thuốc ưa nước thay vì tạo ra các bơm đẩy thuốc hoặc thay đổi sự hình thành màng sinh học so với kiểm soát véc tơ trống.Phân tích phiên mã và chuyển hóa cho thấy sự giảm chuyển hóa của quá trình phân hủy ppx2 được đặc trưng bởi sự giảm phiên mã và dịch mã và giảm nồng độ glycerol-3-phosphate.Tóm lại, poly(P) đóng một vai trò quan trọng trong việc hạn chế sự phát triển của M. tuberculosis và giảm quá trình trao đổi chất, đồng thời góp phần vào khả năng dung nạp kháng sinh thông qua tính thấm của thành tế bào bị thay đổi. Phản ứng nghiêm ngặt, liên quan đến các phân tử điều hòa polyphosphate vô cơ [poly(P)] và (p )ppGpp, được cho là trung gian cho sự tồn tại của Mycobacterium tuberculosis.Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xác định được một loại enzyme mới (Rv1026, PPX2) chịu trách nhiệm thủy phân poly(P) chuỗi dài.Một chủng M. tuberculosis biến đổi gen thiếu gen ppx2 cho thấy nồng độ poly(P) tăng lên, có liên quan đến việc ngăn chặn sự phát triển sớm của vi khuẩn và giảm tính nhạy cảm đối với thuốc đầu tiên isoniazid, cũng như tăng khả năng sống sót của vi khuẩn khi tiếp xúc với căng thẳng điều kiện và trong đại thực bào.So với chủng đối chứng, chủng đột biến cho thấy độ dày của thành tế bào tăng lên và giảm tính thấm thuốc.Phân tích chất chuyển hóa và biểu hiện gen toàn cầu cho thấy sự giảm biểu hiện của bộ máy phiên mã và dịch mã cũng như sự thay đổi trong việc sử dụng nguồn carbon.Tóm lại, việc điều chỉnh cân bằng poly(P) là rất quan trọng đối với sự hình thành hồng cầu ở M. tuberculosis.