Các sản phẩm

Tương tự như các virus ARN sợi dương khác, các vi rút Tombus được sao chép bởi phức hợp sao chép virus gắn màng (VRC).VRC bao gồm RNA polymerase phụ thuộc RNA (RdRp) được mã hóa bởi virus p92, chaperone RNA p33 của virus và một số protein ký chủ đồng chọn.Để trở thành một RdRp chức năng sau quá trình dịch mã, protein sao chép p92 phải được tích hợp vào VRC, sau đó là kích hoạt nó.Trước đây, chúng tôi đã chỉ ra trong một thử nghiệm dựa trên chiết xuất nấm men không có tế bào rằng việc kích hoạt RdRp của vi rút gây bệnh còi cọc cà chua (TBSV) yêu cầu (các) yếu tố vật chủ hòa tan.Trong bài viết này, chúng tôi xác định protein sốc nhiệt tế bào 70 (Hsp70) là yếu tố vật chủ đồng chọn cần thiết để kích hoạt TBSV RdRp tái tổ hợp bị cắt ngắn ở đầu cuối N.Ngoài ra, việc chặn chức năng Hsp70 dựa trên phân tử nhỏ sẽ ức chế quá trình tổng hợp RNA bởi vi rút Tombus RdRp trong ống nghiệm.Hơn nữa, chúng tôi chỉ ra rằng phospholipid trung tính, cụ thể là phosphatidylethanolamine (PE) và phosphatidylcholine (PC), tăng cường kích hoạt RdRp trong ống nghiệm.Ngược lại, phosphatidylglycerol (PG) cho thấy tác dụng ức chế mạnh và vượt trội đối với hoạt hóa RdRp trong ống nghiệm.Chúng tôi cũng chứng minh rằng PE và PC kích thích tương tác RdRp-virus cộng chuỗi RNA [(+)RNA], trong khi PG ức chế sự gắn kết của RNA virus với RdRp.Dựa trên vai trò kích thích và ức chế của các loại phospholipid khác nhau trong quá trình kích hoạt RdRp của Tombusvirus, chúng tôi đề xuất rằng thành phần lipid của màng tế bào mục tiêu có thể được Tombusvirus sử dụng để điều chỉnh quá trình lắp ráp VRC mới trong quá trình lây nhiễm. RNA polymerase phụ thuộc RNA được mã hóa bởi virus (RdRp), chịu trách nhiệm tổng hợp thế hệ RNA của virus trong các tế bào bị nhiễm của một số virus RNA chuỗi dương tính, ban đầu không hoạt động.Chiến lược này có khả năng tránh được sự tổng hợp RNA của vi-rút trong bào tương mà sẽ nhanh chóng dẫn đến việc tạo ra các phản ứng chống vi-rút của tế bào do RNA kích hoạt.Trong quá trình lắp ráp phức hợp sao chép gắn màng, RdRp của virus sẽ được kích hoạt thông qua một quy trình chưa được hiểu đầy đủ giúp RdRp có khả năng tổng hợp RNA.Bằng cách sử dụng TBSV RdRp, chúng tôi cho thấy rằng chaperone Hsp70 của tế bào đồng chọn và phospholipid trung tính tạo điều kiện kích hoạt RdRp trong ống nghiệm.Ngược lại, phosphatidylglycerol (PG) có tác dụng ức chế vượt trội đối với hoạt hóa RdRp trong ống nghiệm và tương tác RdRp-RNA của virus, cho thấy rằng miền vi mô màng bao quanh RdRp ảnh hưởng lớn đến khả năng tổng hợp RNA của nó.Do đó, việc kích hoạt RdRp của virus có thể phụ thuộc vào nhiều thành phần vật chủ trong các tế bào bị nhiễm bệnh.