Các sản phẩm

1. Các phương pháp lập hồ sơ chất chuyển hóa là công cụ quan trọng để đo lượng chất chuyển hóa trong các hệ thống sinh học.Trong khi hầu hết các phương pháp định hình chất chuyển hóa báo cáo cường độ tương đối hoặc phụ thuộc vào một số tiêu chuẩn nội bộ đại diện cho tất cả các chất chuyển hóa, thì yêu cầu cuối cùng đối với mô tả định lượng về nhóm chất chuyển hóa trong tế bào sinh học và chất lỏng là xác định nồng độ tuyệt đối.Chúng tôi báo cáo ở đây một phương pháp lập hồ sơ chất chuyển hóa được nhắm mục tiêu thông lượng cao và nhạy cảm/khối phổ song song (GC/MS/MS) cho phép định lượng tuyệt đối tất cả các chất chuyển hóa được phát hiện.Phương pháp này dựa trên việc tạo dẫn xuất metyl cloroformate và định lượng bằng cách thêm các mẫu với các chất chuẩn chuyển hóa được tạo dẫn xuất riêng biệt với các thuốc thử tạo dẫn xuất khử màu.Quá trình ion hóa tác động điện tử truyền thống được thay thế bằng quá trình ion hóa hóa học dương do quá trình ion hóa hóa học tích cực bảo tồn ion phân tử và các mảnh có trọng lượng phân tử cao khác ở mức độ lớn hơn nhiều.Điều này làm cho việc chọn các chuyển đổi MS/MS duy nhất trong số nhiều chất chuyển hóa kết hợp trở nên dễ dàng hơn.Hiện tại, phương pháp GC/MS/MS mới bao gồm 67 chất chuyển hóa sơ cấp phổ biến hầu hết thuộc nhóm axit hữu cơ amino và không phải amino.Chúng tôi cho thấy khả năng ứng dụng của phương pháp trên các mẫu nước tiểu và huyết thanh.Phương pháp này là một cải tiến đáng kể của phương pháp hiện tại đối với hồ sơ định lượng chất chuyển hóa GC/MS của axit amin và axit hữu cơ không phải amino.

2,24S-Hydroxycholesterol (24OHC) và 27-hydroxycholesterol (27OHC) là hai oxysterol có cấu trúc tương tự nhau nhưng có nguồn gốc khác nhau—loại trước hầu như chỉ được hình thành trong não và loại sau được hình thành ở mức độ ít hơn trong não so với hầu hết các cơ quan khác.GIẢ THUYẾT CẦN KIỂM TRA: Tổn thương tế bào thần kinh và/hoặc mất myelin làm tăng dòng 24OHC từ não vào dịch não tủy (CSF), trong khi khiếm khuyết hàng rào máu não làm tăng dòng 27OHC từ tuần hoàn vào dịch não tủy. Khối lượng pha loãng đồng vị phép đo phổ đã được sử dụng để phân tích hai oxysterol trong CSF và huyết tương từ hơn 250 bệnh nhân mắc các bệnh thần kinh và lão khoa khác nhau. Mức độ CSF của hai oxysterol bị ảnh hưởng nhiều hơn bởi các bệnh khác nhau so với mức độ trong huyết tương.Bệnh nhân mắc bệnh mất myelin hoạt động đã tăng mức 24OHC trong CSF với tỷ lệ 24OHC/27OHC tương đối cao.Bệnh nhân bị viêm màng não nói chung có nồng độ cao của cả hai loại steroid với tỷ lệ 24OHC/27OHC thấp.Bệnh nhân mắc bệnh Alzheimer có mức 24OHC tăng nhẹ trong CSF với mức tăng ít hơn ở 27OHC.Bệnh nhân mắc bệnh đa xơ cứng có xu hướng có mức 24OHC cao hơn trong thời gian hoạt động với tỷ lệ 24OHC/27OHC cao. Việc đo hai oxysterol trong CSF và huyết tương có thể bổ sung đáng kể vào các phương pháp sinh hóa hiện có để đánh giá các bệnh thần kinh.