Các sản phẩm

Con đường phân tử gây bệnh trong các bệnh gan xơ gan như virus viêm gan C (HCV), viêm gan tự miễn (AIH) và xơ gan mật nguyên phát (PBC) được mô tả kém.Các gen biểu hiện khác nhau thường rất quan trọng trong sinh bệnh học.Phép lai trừ triệt tiêu (SSH) là một cách tiếp cận trên toàn bộ bộ gen làm phong phú thêm cho các bản phiên mã mRNA được biểu thị khác nhau.Chúng tôi nhằm mục đích thực hiện các quan sát mới về biểu hiện gen khác biệt trong bệnh xơ gan bằng cách sử dụng SSH kết hợp với phản ứng chuỗi polymerase sao chép ngược thời gian thực định lượng (RT-PCR).Các phiên mã gan trong xơ gan HCV, xơ gan AIH, PBC và mô gan không bị bệnh đã được kiểm tra bằng SSH.Kết quả là các dòng vô tính DNA bổ sung (cDNA) đã được sàng lọc lại để biểu hiện khác biệt bằng phép lai chấm-blot và sau đó giải trình tự.Biểu hiện gen được chọn đã được định lượng bằng RT-PCR thời gian thực.Sau SSH, 694 dòng vô tính đã được sàng lọc lại để biểu hiện gen khác biệt, trong đó 145 dòng được giải trình tự và được phát hiện có nguồn gốc từ 89 gen khác nhau.Bảy dòng vô tính chỉ tương đồng với các trình tự mã hóa thẻ trình tự được biểu thị (EST) không có chức năng đã biết.Sự biểu hiện điều chỉnh tăng của bốn gen đã được xác nhận bằng RT-PCR thời gian thực: thành viên siêu họ 3 xuyên màng 4 (tetraspanin CO-029) trong tất cả các dạng xơ gan, protein tương tác nhím (HIP) trong xơ gan AIH và chitinase 3-like-1 (HC gp-39 hoặc ykl-40) và lặp lại axit arginine-glutamic (RERE) trong xơ gan HCV.Đa hình gen RERE và các biến thể mối nối đã được quan sát thấy trong tất cả các mô được kiểm tra.Điều chỉnh tăng Tetraspanin CO-029 chủ yếu tập trung vào các tế bào ống mật.Tóm lại, những quan sát mới về biểu hiện gen khác biệt trong bệnh xơ gan ở người đã được thực hiện bằng SSH làm công cụ khám phá chính.Đặc biệt, cần có những nghiên cứu sâu hơn về gen RERE và các sản phẩm của nó trong bệnh gan liên quan đến HCV.